Хемилюминесцентный агент, используемый для люминесценции, очень разный!
October 23 , 2024
Технология хемилюминесцентного иммуноанализа давно известна в области диагностики in vitro! К ним относятся прямая хемилюминесценция, электрохемилюминесценция, ферментативная хемилюминесценция, непрямая хемилюминесценция. Во многих типах люминесценции используются люминесцентные вещества, которые тоже очень разные! 1. Акридиновый эфир
Прямая хемилюминесценция
Эфир акридина (АЭ) представляет собой трициклическое органическое соединение, склонное к окислению. При окислении H2O2 в щелочных условиях он излучает свет с длиной волны 470 нм и имеет высокую светоотдачу. Его возбужденный продукт N-метилакридон представляет собой люминит реакционной системы люминесценции. Он используется для мечения гаптенов и белков или поликлональных или моноклональных антител.
Это синтетическое вещество, которого не существует в природе, поэтому фоновые шумы отсутствуют; Эфир акридина относительно нечувствителен к изменениям pH и температуры. В то же время его молекулярная масса составляет всего 481, эффект пространственного затруднения невелик, и реакция окисления не требует катализатора, если ее можно проводить в щелочной среде.
Свечение реагирует быстро и имеет низкий фон. В ходе реакции окисления конъюгат разлагается, поэтому люминесценция свободного эфира акридина не ингибируется, а реагент обладает хорошей стабильностью. Это отличный выбор люминесцентного агента в отрасли.
Терапридин рутения [RU(bpy)3]2+ представляет собой электрохемилюминесцентный агент, который окисляется донором электронов трипропиламином (TPA) на поверхности анода. Прямое мечение антигенов или антител.
Люминесценция характеризуется стабильным световым излучением длительностью всего 0,01 мс, достигающим пика при 300 мс, а цикл электрохемилюминесценции в сотни тысяч циклов в секунду значительно повышает чувствительность анализа.
Маркировка стабильна и легко контролируется, но электрическое поле требует специальной измерительной ячейки, и очистка измерительной ячейки после каждого измерения занимает 40-60 секунд, чтобы вернуть электрод в состояние, которое легко вызвать. перекрестное загрязнение влияет на точность результатов и снижает скорость анализа.
3.Люминол и его производные
Ферментативная хемилюминесценция
Люминол (3-аминобензоилгидразид), изолюминол (4-аминобензоилгидразид) и их производные обладают хемилюминесцентными свойствами.
В нейтральном растворе: обычно присутствует в виде дипольных ионов (цвиттер-ионов).
В щелочном растворе: он становится двухвалентным анионом, который может быть окислен молекулами кислорода до промежуточного продукта, который может вызвать явление хемилюминесценции.
В окислителях: люминол переходит в возбужденное состояние, которое распадается на основное состояние и флуоресцирует.
4. адамантан AMPPD
Ферментативная хемилюминесценция
В целом структура адамантана очень стабильна, но когда встречается щелочная фосфатаза, щелочная фосфатаза катализирует адамантан, удаляя фосфатную группу с образованием нестабильного промежуточного продукта, который автоматически разлагается и производит световой сигнал с длиной волны 470 нм, который может длиться в течение от десятков минут до нескольких часов.
5. Фотоиндуцированная хемилюминесценция
особенность
Короткое время реакции: гомогенная картина реакции.
Высокая чувствительность: процесс реакции усиливается шаг за шагом, а люминесценция быстро повышает чувствительность.
Хорошая стабильность: весь процесс генерации, передачи и усиления энергии (света) очень стабилен, и на него не так легко влияют pH, ионная сила и температура.